Het gieten van slurry in de kolom
In deze paragraaf wordt ervan uitgegaan dat de kolom is voorgevuld.
1 Laat de slurry in de container met medium hersuspenderen door voorzichtig te
2 Giet het gepaste volume van geresuspendeerde slurry (zie Column Packing Summary
3 Was eventueel resterend medium uit de container en giet dit in de kolom.
4 Gebruik de mediumroerstaaf om het medium voorzichtig in de slurry te roeren, zodat
5 Voeg meer pakkingvloeistof toe aan de kolom, helemaal tot aan de rand van de
6 Laat de kolom ongestoord staan zodat het medium kan beginnen met sedimenteren.
7 Monteer de adapter en bovenplaat op de kolom (zie Monteren van de bovenplaat en
AxiChrom 140- en 200-kolommen Bedieningsinstructies 28-9431-23 AG
5.1 Intelligent Packing van de kolom bij ÄKTAprocess en ÄKTApilot
schudden tot deze volledig homogeen is.
Opmerking:
Zorg dat de slurryconcentratie overeenkomt met de waarde die in de
wizard is ingevoerd.
in Intelligent Packing wizard of in de methodeaantekeningen) in de kolombuis.
Opmerking:
Het heeft de voorkeur om de gelslurry tegen de binnenwand van de
kolombuis te gieten, om zo weinig mogelijk lucht in de slurry te vangen.
De kolom echter niet kantelen om dit te bereiken.
er geen klonten medium overblijven en de slurry goed wordt gemengd. Zorg dat er
geen gesedimenteerd medium op de bodem van de kolom achterblijft.
Opmerking:
Het kan nodig zijn om het niveau van de slurry in de kolombuis te
verlagen om de verplaatsing van volume door middel van de medium-
roerstaaf en extra vloeistofvolume door het spoelen te vergemakkelij-
ken.
glazen kolombuis. Medium dat op de kolomwand of in de inlaat van de hydraulische
kamer blijft zitten, moet met behulp van pakkingvloeistof naar beneden in de gelslurry
worden gespoeld. Wanneer er te weinig vloeistof wordt toegevoegd, neemt het risico
van gevangen luchtbellen toe, terwijl te veel vloeistof de kans op morsen vergroot
wanneer de adapter wordt geplaatst.
De sedimentatiesnelheid hangt af van het medium. Wacht totdat er een heldere kop
vloeistof zo'n 1-2 cm boven het niveau van het sedimenterende medium ontstaat,
voordat u de adapter plaatst. Dit vermindert het risico dat er medium omhoog wordt
gedwongen tot voorbij het benedenoppervlak van de adapter. Wacht maximaal 15
minuten om een groottegradiënt in het bed te voorkomen.
AANWIJZING
Plaats de adapter in de mond van de kolombuis om te zorgen
dat er geen lucht in de kolom wordt gevangen.
adapter, op pagina 43).
5 Gebruik
79